乙酰胆碱作用于毒碱性受体实质上是开放K + 通道,因此可减缓心脏的速率。心脏细胞用百日咳菌外毒素处理封闭了这种生理应答,暗示了G-蛋白负责耦联受体刺激通道活性。这个过程能被直接用于研究应用内外膜片钳技术。在这项技术中,一片膜被移液管移出细胞。膜的外表面在移液管中与溶液相连,细胞质表面朝外,以接触不同的溶液(图14-3-16)。受体、G-蛋白和K + 通道通过膜片保持联系。K + 通道的状况可用测量通过膜的流量来评估。当乙酰胆碱加入到移液管(用正号标明)时,用一完整细胞接触,可用流量表明K + 通道是否打开(图14-3-16A)。在相似的情况下,用一片膜插入到盐的缓冲液中,没有流量出现(图14-3-16B)。然而当GTP加入到缓冲液中时,流量恢复(图14-3-16C),接着GTP被除去,停止这种流动(图14-3-16D)。表14-3-16中总结了几组相似实验的结果以检验不同联合组分的影响。 表14-3-16 K + 通道对不同实验混合物的反应 乙酰胆碱 小分子加入到缓冲液 纯化的G蛋白成分加入 到缓冲液 K + 通道 1 + 没有 无 关 2 + GTP 无 开 3 GTP 无 关 4 GppNp 无 开 5 没有 G蛋白 关 6 没有 G α 开 7 没有 G βγ 关 8 没有 煮沸的G蛋白 关