为了弄清楚趋化因子受体的结构与刺激识别、信号转导以及适应其功能之间的关系,可从Salmonella typhimurium克隆天冬氨酸受体基因。与此同时,也可克隆此受体的丢失了C末端35个氨基酸的基因的突变形式。通过转导使野生型截短了的基因进入丢失了天冬氨酸受体正常基因的突变的鞭毛菌(Salmonella)中。测试两类克隆基因间的功能差异时发现,截短了的受体仍含甲基化靶标的序列,这在细胞中是不能被甲基化的。天冬氨酸与野生型受体、截短了的受体的结合,与它与细胞内正常受体的结合是一样的,克隆受体较正常情况多15倍。 为了检验克隆受体的信号转导过程和分析它们的适应特征,可将含受体的细菌接受天冬氨酸浓度突然变化这一刺激。在缺乏引诱物的情况下,野生型菌株每隔几秒钟改变一次转动(摆动)方向。一旦加入引诱物,转动方向改变这一活动被抑制,因而引起一段时期的平衡活动。若引诱物浓度保持恒定(即使浓度很高),野生型菌株很快适应,再次开始每隔几秒钟一次的摆动。为观察在实验条件下这些行为的改变,你可粘连细菌的鞭毛到盖玻片上,以便观察它们转动的方向。加入天冬氨酸并计算在加入天冬氨酸后1分钟未改变转动方向的细菌的数目。野生型细胞和含克隆天冬氨酸受体的细胞的结果如图14-3-27。