假如你要用表达载体pET28a表达一个蛋白,该蛋白的基因CDS如下: >ORF ATGAACGCTACACACTGCATCTTGGCTTTGCAGCTCTTCCTCATGGCTGTTTCTGGCTGTTACTGCCACG TGTTGCCGGAATTCAGCCTCAGGAAGCGGAAAAGGAGTCGCTGCTGA 酶切位点分析可以用DNAMAN,或在线工具网址:http://nc2.neb.com/NEBcutter2/index.php 通过在PCR引物5’端加入酶切位点,扩增该片段后,PCR产物经双酶切接入pET28a载体的多克隆位点(MCS)区,载体MCS区序列如下: 在设计 PCR 引物时,如果下游引物 5’ 端加入的酶切位点是 XhoI ,上游引物 5’ 端理论上可以加入酶切位点有()