特殊转录因子的纯化给人带来很多困难，因为分析速度慢，并且转录因子本身不稳定，当你鉴定出你所需片段时，这个因子通常已经失活。你可以想出一个极好的方法以加快分析速度。你可以合成一段不含胞嘧啶核苷酸的DNA序列，将这段序列放到启动子后在一适当反应混合物中，这个启动子将指导不含鸟嘌呤核苷酸的转录本的合成，如果不加GTP，只产生一定长度的RNA转录本，这个RNA转录本来自的DNA序列。因为其他转录本都在需G处被终止。如果你能使这个想法得到实现，则快速分析特殊序列的转录仅通过测量标记核苷酸的放射性就可实现。 为了验证你的想法，你构建两个携带合成DNA的质粒。一个具有腺病毒的启动子(PmL1)，另一个无启动子(PC1)。把两种质粒同纯化的RNApolⅡ、纯化好的转录因子样品及 32 P-CTP混合，除此之外，再加入各种组合的GTP、RNaseT1(可以切开RNA与G的连接)和3'-氧甲基GTP(无论何时它参入正在形成的链，它就会终止转录)，通过凝胶电泳测定结果如图13-3-42所示。