1 非同版教材 用于思考巩固 (二)填空题 1. 将抗体或抗原结合到固相载体的表面,是异相酶免疫测定中迅速分离( )和( )的最常用方法。 2. 酶免疫试验中常用的固相载体种类有( )、( )和( )。 3. 抗原或抗体的包被可采用( )和( )方式吸附于固相载体。 4. 为有效减少空间位阻效应,提高抗原(抗体)的利用效率,可采用 ( ) 或 ( ) 将抗体或抗原间接吸附于固相上。 5. 在酶免疫试验中常用的标记酶有( )和( )。 6. ELISA 方法的建立主要包括待测物选择、免疫原的设计与合成、抗体的制备、( )及对所建立的方法进行评价等步骤。 7. 包被抗原或抗体的浓度以及酶标抗原或抗体的浓度通常采用( )来确定最佳的工作浓度。 8. ELISA 反应结束后需用酶标仪测定溶液的( )。 9. 在 ELISA 定性结果的报告上要区分阴性和阳性反应,就必须在“阴性”和“阳性”之间有一条明确的分界线,即“( )”,这是定性免疫测定结果报告的依据。 10. ELISA 既可用于测定抗原,又可用于测定抗体。根据测定抗原和抗体的不同可采用( )、( )、( )和( )四种基本类型。 11. 在 ELISA 应用双位点一步法检测时,若标本待测抗原浓度过,易出现( )。 12. 抗体的检测通常不采用( )法,但当相应抗原材料中含有难以去除的杂质、不易得到足够的纯化抗原或抗原性质不稳定时,可采用此法。 13. IgM 抗体作为临床病原体急性或近期感染的重要指标,在 ELISA 中主要用( )法进行检测。 14. 在酶免疫试验中,为减小类风湿因子及其他非特异抗体干扰,标本( )再进行检测。 15. 酶联免疫斑点试验结合了( )技术和( )技术,目前主要用于细胞因子分泌细胞的定量测定。 16. ELISPOT 检测的最终数据是( ),即在细胞群体中,受某种特异性抗原刺激而分泌某种细胞因子的阳性细胞比例。 17. 根据酶促发光底物的不同,发光酶免疫试验可分为( )和( )两类。 18. 在 EIA 检测过程中,时常会有检测结果与实际结果不符的情况出现。主要受( )、( )、( )、( )等因素影响。 19. 酶免疫测定试剂盒的有效使用期限是根据( )的稳定性而定的,环境影响。 20. 荧光酶免疫试验中 ALP 可催化发光底物 4-MUP 分解形成( ),经 360nm 激发光照射,发出 450nm 的荧光。 (三)单项选择题 A型题 1. ELISA板最常用的固相材料是 A.聚苯乙烯 B.聚氯乙烯 C.硝酸纤维素膜(NC膜) D.尼龙膜 E.聚偏二氟乙烯膜(PVDF膜) 2. TMB经HRP作用后呈现蓝色,应用酶标仪检测时最大吸收波长为 A.380nm B.420nm C.450nm D.490nm E.570nm 3. ELISA板包被后,最常用的封闭剂是 A.人血清球蛋白 B.牛血清球蛋白 C.人血清白蛋白 D.牛血清白蛋白 E.2%脱脂牛奶 4. 酶免疫试验检测方法中,HRP的底物不包括 A.OPD B.AEC C.4-MUP D.鲁米诺 E.TMB 5. ELISA包被时通常使用的缓冲液为 A.pH 7.4磷酸盐缓冲液 B.pH 7.4碳酸盐缓冲液 C.pH 7.4枸橼酸盐缓冲液 D.pH 8.6磷酸盐缓冲液 E.pH 9.6碳酸盐缓冲液 6. 均相酶免疫试验主要应用于下列哪类物质的测定 A.细菌抗原 B.病毒 C.Ig D.补体 E.药物和小分子物质 7.在ELISA定性测定中,哪种方法类型S/CO<1 结果判断为阳性反应 A.间接法 B.双抗原夹心法 C.竞争法 D .捕获法 E .双抗体夹心法 8. 与克隆酶供体免疫试验(CEDIA)技术不符合的特点是 A.是一种均相酶免疫技术 B.单独的EA或ED片段不具有酶活性 C.EA和ED片段结合后形成具有生物活性的碱性磷酸酶 D.通常标记抗原的是ED片段 E.酶活性大小与待检抗原含量呈正相关 9. ELISA中用于测定特异抗体亚型常采用的方法是 A.双抗体夹心法 B.双抗原夹心法 C.竞争法 D.间接法 E.捕获法 10. ELISA检测方法中,关于竞争法下列哪种说法正确 A.只用于检测抗原 B.只用于检测抗体 C.待测管的颜色比参照管的淡表示被检测量物少 D.被检测物含量高,则酶标记物被结合的机会少 E.被检测物与酶标记物的免疫活性各不相同 11. ELISA双抗原夹心法检测抗体时,固相载体包被物是 A.未标记的已知抗原 B.未标记的已知抗体 C.未标记的抗抗体 D.酶标记的抗原 E.酶标记的抗体 12. ELISA检测中出现“钩状效应(hook effect)”通常见于 A.双抗体夹心法检测抗原时抗原过量 B.间接法检测过量抗体 C.双抗原夹心法检测抗体时抗体过量 D.双抗体夹心法检测抗原时类风湿因子的干扰 E.竞争法检测抗体时 13. 在下列ELISA方法中,检测最后显示的颜色深浅与标本中的待测抗原或抗体呈负相关的是 A.双抗原夹心法 B.双抗体夹心法 C.竞争法 D.间接法 E.捕获法 14. 在酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测中常用的固相载体是 A.聚氯乙烯 B.尼龙膜 C.硝酸纤维素膜(NC膜) D.聚偏二氟乙烯膜(PVDF膜) E.聚苯乙烯 15. 在下列酶作用底物中,能产生不溶性色素的是 A.OPD B.TMB C. BCIP/NBT D.4-MUP E.PNP 16. 临床上应用 ELISA 检测乙型肝炎病毒核心抗体时,常采用哪种模式 A.双抗原夹心法 B.双抗体夹心法 C.间接法 D.竞争法 E.捕获法 17. 下列检测方法中需要进行细胞培养的是 A. 化学发光酶免疫试验 B.酶联免疫斑点试验 C.ELISA D. 荧光酶免疫试验 E.斑点酶免疫吸附试验 18. 应用捕获法检测病原体的IgM类抗体时,其酶标二抗是 A.抗人α链抗体 B.抗人μ链抗体 C.抗人δ链抗体 D.抗人ε链抗体 E.抗人γ链抗体 19. 下列哪种方法检测时不用分离结合酶标记物和游离酶标记物 A. 化学发光酶免疫试验 B.酶联免疫斑点试验 C. 荧光酶免疫试验 D.克隆酶供体免疫试验 E.ELISA 20. 下列哪种反应类型检测时易出现“钩状效应(hook effect)”,导致结果假阴性 A.间接法 B.双位点一步法 C.双抗原夹心法 D.竞争法 E.捕获法 B型题 ( 1~2题共用备选答案) A. 辣根过氧化物酶 B. 葡萄糖氧化酶 C. β - 半乳糖苷酶 D .碱性磷酸酶 E .葡萄糖 -6- 磷酸脱氢酶 1. ELISA中最常用的酶是 2. 荧光酶免疫试验最常用的酶是 ( 3~4题共用备选答案) A.OPD B.4-MUP C.BCIP/NBT D.TMB E.PNP 3. ELISA中最常用的显色底物是 4. 荧光酶免疫试验最常用的发光底物是 ( 5~6题共用备选答案) A .双抗体夹心法 B .竞争法 C .双抗原夹心法 D .间接法 E .捕获法 5. 病原体急性感染时,检测 IgM 型抗体最常用的 ELISA 方法类型是 6. 自身抗体检测最常用的 ELISA 方法类型是 ( 7~8题共用备选答案) A.聚氯乙烯 B.磁微粒 C.硝酸纤维素膜(NC膜) D.聚偏二氟乙烯膜(PVDF膜) E.聚苯乙烯 7. 自动化程度较高的发光酶免疫分析仪常用的固相载体是 8. 酶联免疫吸附试验最常用的固相载体是 ( 9~10题共用备选答案) A.液相酶免疫试验 B.异相酶免疫试验 C.固相酶免疫试验 D.酶联免疫吸附试验 E.均相酶免疫试验 9. 检测时不需要将结合酶标记物和游离酶标记物分离是 10. 检测时分离结合酶标记物和游离酶标记物无需使用固相支持物的是 ( 11~12题共用备选答案) A.竞争法 B.间接法 C.双抗体夹心法 D.双抗原夹心法 E.捕获法 11. 检测抗体最常用的方法是 12. 适用于测定含有至少两个抗原决定簇的多价抗原的方法是 ( 13~14题共用备选答案) A.乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb) B.含有至少两个抗原决定簇的多价抗原 C.小分子抗原或半抗原 D.血清中 IgM 型抗体 E.自身抗体 13. ELISA中捕获法可以用于检测 14. ELISA中竞争法可以用于检测 ( 15~16题共用备选答案) A.OPD B.4-MUP C.BCIP/NBT D.TMB E. AMPPD 15. 用于化学发光酶免疫试验的底物是 16. 用于ELISPOT中PVDF膜斑点显色的底物是