凝胶色谱法广泛用于测定球形蛋白质相对分子质量，通常用D SEC 对分子质量的线性关系作图的方法。求D SEC 需知道V 0 、V R 、V i 、V 0 用很大的分子测量(如燃料蓝色葡萄糖)，这个大分子完全被凝胶排出。V t =V g +V i +V 0 ，其中V t 是柱的总体积，根据柱的直径的长度进行计算，V g 为凝胶体积，通常假定是可忽略的。现有(2.5 cm×36 cm)Sephadex G-75柱，测得以下数据： 物质名称 相对分子质量 V R /mL 蓝色葡萄糖 a．醛缩酶 b．卵清蛋白 c．糜蛋白酶A d．核糖核酸酶A 2000000 158000 45000 25000 13700 53．1 56.0 71.8 82.8 93.0 估算具有V B =76.5mL的蛋白质的相对分子质量。