1 严格地说限制性内切核酸酶(restriction endonuclease)是指已被证明是 的酶。基因工程中把那些具有识别 内切核酸酶统称为限制性内切核酸酶。 II 类限制性内切核酸酶分子量较小.一般在20~40kDa,通常由 亚基所组成。它们的作用底物为双链 DNA,极少数II类酶也可作用于单链 DNA,或DNA/RNA杂合双链。这类酶的专一性强,它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求,而且对更远的碱基也有要求,因此,II类酶既具有专一性,也具有 专一性,一般在识别序列内切割。切割的方式有 ,产生末端的 DNA片段 或 的 DNA片段。作用时需要作辅助因子,但不需要 和 。