假如你要用原核表达载体pET28a质粒表达一个蛋白,该蛋白的基因CDS如下:>ORFATGAACGCTACACACTGCATCTTGGCTTTGCAGCTCTTCCTCATGGCTGTTTCTGGCTGTTACTGCCACGTGTTGCCGGAATTCAGCCTCAGGAAGCGGAAAAGGAGTCGCTGCTGA酶切位点分析可以用DNAMAN,或在线网址:http://nc2.neb.com/NEBcutter2/index.php通过在PCR引物5’端加入酶切位点,扩增该片段后,PCR产物经双酶切接入pET28a载体的BamHI到XhoI之间的单克隆位点(MCS)区,载体MCS区序列如下:【图片】在设计PCR引物时,上下游引物5’端分别加入的酶切位点是SalI和NotI,为保证表达蛋白序列不移码,在酶切位点后理论上可以加入( )